A global double-fluorescent Cre reporter mouse

A global double-fluorescent Cre reporter mouse

Mandar Deepak Muzumdar, Bosiljka Tasic, Kazunari Miyamichi, Ling Li, Liqun Luo

Genesis, Volume 45, Issue 9 , Pages 593 – 605

Dans le genre développement d’outils pour la recherche par manipulation génétique un très bel exemple, qui me fait penser aux BigBlue, les rats utilisés pour les études de toxicologie, mais ici en plus beaux quand même.

Le principe est aussi simple qu’élégant. Avant l’activation de l’excision Cre dépendante les cellules expriment une protéine fluorescent en rouge, localisée aux niveau des membranes plasmiques. L’activation de Cre bascule le système qui exprime par la suite une protéine fluorescent en vert !mtmg.jpg
C’est étonnant qu’ils ne les ont pas placé dans l’autre sens, vert puis rouge quand le système "mature" :-)

The Cre/loxP system has been used extensively for conditional mutagenesis in mice. Reporters of Cre activity are important for defining the spatial and temporal extent of Cre-mediated recombination. Here we describe mT/mG, a double-fluorescent Cre reporter mouse that expresses membrane-targeted tandem dimer Tomato (mT) prior to Cre-mediated excision and membrane-targeted green fluorescent protein (mG) after excision. We show that reporter expression is nearly ubiquitous, allowing visualization of fluorescent markers in live and fixed samples of all tissues examined. We further demonstrate that mG labeling is Cre-dependent, complementary to mT at single cell resolution, and distinguishable by fluorescence-activated cell sorting. Both membrane-targeted markers outline cell morphology, highlight membrane structures, and permit visualization of fine cellular processes. In addition to serving as a global Cre reporter, the mT/mG mouse may also be used as a tool for lineage tracing, transplantation studies, and analysis of cell morphology in vivo.

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